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    產品詳情
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    • 產品名稱:SF9

    • 產品型號:
    • 產品廠商:佰曄生物
    • 產品文檔:
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    簡單介紹:
    SF9
    詳情介紹:

    sf9昆蟲細胞昆蟲卵巢細胞產品基本信息

    出品公司: Invitrogen
    細胞名稱: SF9, SF9昆蟲細胞, 昆蟲卵巢細胞, sf9細胞
    細胞類型: 昆蟲細胞
    產品目錄號: 11496015/ B82501/ 12659017
    培養基: Sf-900 II SFM/ Sf-900 III SFM/ Grace's Insect Medium
    生長條件: 28 ℃,  有氧,不需要二氧化碳
    質粒轉化條件: 病毒感染
    應用: 用于桿狀病毒增殖和重組蛋白表達
    誘導方法: 桿狀病毒誘導
    細胞特點:
    Sf9 細胞是克隆分離物,來自于草地貪夜蛾 (Spodoptera frugiperda ) (Fall Armyworm) IPLB-Sf21-AE 細胞,可用于瞬時或穩定表達重組蛋白。 Sf9 是經過馴化的細胞,可用于 Sf-900 II SFM 中的無血清懸浮培養,因此可以節約無血清和/或懸浮培養馴化所需的時間和成本 (1,2)。 過去,昆蟲細胞在靜態系統中進行培養,使用 T 形瓶和添加血清的基本培養基 (3)。 昆蟲細胞一般無需貼壁,我們建議在懸浮培養中維持 Sf9 接種儲液,使其更靈活,更易于使用。

    • 使用有譜系記錄的低傳代細胞制成(傳代總次數為 45 至 50 代,無血清傳代 15 至 20 次)。
    •  
    • 以含有 7.5% DMSO 的 Sf-900 II SFM 冷凍儲液提供。
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    • 細胞總數 1.5 x 107
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    • 可以解凍并直接在懸浮培養物中使用,快速擴增細胞儲液,增殖桿狀病毒儲液和生產重組蛋白,或者在轉染或噬菌斑分析應用中用作單層。


    SF9昆蟲細胞特點和簡介

    該細胞系源于雌性草地貪夜蛾蛹的卵巢組織,可以用于復制桿狀病毒表達載體。

    SF9細胞接受后處理

    1) 收到細胞后,請檢查是否漏液 ,如果漏液,請拍照片發給我們。

     2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長 狀態,去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。

     3) 棄去T25瓶中的培養基,添加 6ml本公司附帶的完全培養基。

     4) 如果細胞密度達80%-90%請及 時進行細胞傳代,傳代培養用6ml本公司附帶的完全培養基。

     5) 接到細胞次日,請檢查細胞是 否污染,若發現污染或疑似污染,請及時與我們取得聯系。
     

    SF9昆蟲卵巢細胞培養操作

    1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。**天換液并 檢查細胞密度。

     2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。      
       
         1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

         2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。  
       
         3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。

         4. 將sf9細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

     3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

        1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

        2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

        3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

    SF9細胞培養注意事項

     1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現 象發生請及 時和我們聯系。
     
     2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所 需細胞因子 等,確保細胞培養條件一致。若由于培養條件不一致而導致細胞出現問 題,責任由客戶自行承擔。

     3.   用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細胞會有少量 從瓶 壁脫落,將細胞置于培養箱內靜置培養 4~6 小時,再取出觀察。此時多數細胞均 會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常, 請將細胞離心后用新鮮培養基再次貼壁培養;如果染色結果顯示細胞無活 力,請拍下 照片及時和我們聯系,信息確認后我們為您再免費寄送一次。

     4.   靜置細胞貼壁后,請將細胞瓶內的培養基倒出,留 6~8mL 維持細胞正常培養,待細 胞匯 合度  80%左右時正常傳代。

     5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用,細胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養基混合,使細胞逐漸適應培養條件。

     6.   建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和 Procell 技術 部 溝通交流。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯 系,告知細胞的具體情況,以便我們 的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

     7.該細胞僅供科研使用。

    sf9昆蟲細胞昆蟲卵巢細胞產品說明書pdf版和相關資料下載

    sf9昆蟲細胞昆蟲卵巢細胞產品應用舉例

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